细胞划痕实验

应用简介

 细胞划痕是一

种简单易行的检测细胞运动的方法，实验成本低，可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。

技术原理

创伤愈合实验是一种简单、廉价的方法，也是最早发展起来的研究定向细胞在体外迁移的方法之一。该方法模拟了细胞在体内愈合过程中的迁移过程。基本步骤包括在细胞单层中创建一个“伤口”，在细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像以关闭伤口，以及比较图像以确定细胞迁移速率。

实验方法

注意事项

1、一般做划痕实验，都是在无血清或者底血清状态下培养的，否则细胞增殖就不能忽略。

2、按照6孔板背后画线的垂直方向划痕，可以形成若干交叉点，作为固定的检测点，这就解决了前后观察时位置不固定的问题。

3、划痕法测量适用的细胞范围较小，一般只适用于上皮细胞，纤维样细胞。

4、虽然无血清培养可以忽略细胞增殖的影响，但是由于细胞内信号传导系统整体性的下调节，细胞迁移的速度也会慢很多。

细胞划痕实验通过模拟细胞迁移过程来研究细胞运动能力，实验过程中需严格把控细节，确保结果准确可靠。首先，铺板时要保证细胞均匀分布，密度适中，避免因细胞疏密不均导致划痕愈合速度不一致；细胞生长至完全融合状态后再进行划痕，否则会影响实验重复性。

划痕操作是实验关键，需使用灭菌且口径一致的工具（如枪头），保持垂直力度均匀，避免反复刮擦造成划痕宽度不一或损伤培养板底部；划痕后迅速用 PBS 轻柔冲洗，去除脱落细胞，防止其干扰迁移观察。

后续培养过程中，为减少血清对细胞迁移的影响，建议更换无血清或低血清培养基；培养期间避免频繁移动培养板，防止外力干扰细胞迁移。拍照记录时，需在同一视野下，于 0、6、12、24 小时等时间点采集图像，以分析划痕愈合进程；数据分析时，通过 ImageJ 等软件定量计算划痕面积变化，结合多组重复实验结果，提升数据可信度。