10xGenomics单细胞转录组测序

简介

单细胞水平的高通量基因表达谱分析，对复杂细胞群体深入分析，表征单个细胞的表达谱。

可同时检测CRISPR干扰、细胞表面蛋白，避免单个细胞的异质性生物学信息被大量细胞的均质化掩盖。

技术优势

1、不需要微量扩增，降低假阳性率；

2、真正的单细胞水平测序，Doubletrate：0.9%/1000个细胞；

3、灵活的获取量，可一次性对100～80000个细胞建库，提高效率；

4、7分钟之内即可完成单细胞体系制备，捕获效率高达65％；

5、广泛的研究应用领域，超短的项目周期。

10x Genomics 单细胞转录组测序注意事项

样本制备：样本需保持新鲜、活性高，避免反复冻融。组织解离过程中，严格控制酶解时间和温度，防止过度消化或细胞团聚，单细胞悬液浓度应控制在 700-1200 cells/μL，活细胞比例需高于 80%，且无细胞碎片和死细胞污染。

实验操作：严格按照 10x Genomics 标准流程操作，注意试剂保存条件与使用期限，避免气泡产生影响微流体系统运行。进行油包水反应时，精确控制各组分比例，确保每个 GEMs（凝胶珠乳液）仅包裹单个细胞。

数据分析：选择适配的分析工具（如 Cell Ranger、Seurat），合理设置参数（如预期细胞数）。由于数据量大，需足够的计算资源和存储容量。同时，根据实验目的筛选关键细胞亚群，关注批次效应，必要时进行数据整合与标准化处理。

以上涵盖了 10x Genomics 单细胞转录组测序的关键要点。若你还想了解某一环节的详细内容，或有其他需求，欢迎随时告知。